Po uporabi vodikovega peroksida (zlasti uparjenega vodikovega peroksida VHP) za dezinfekcijo in sterilizacijo v biološko varnostnih omarah sta strogo in znanstveno spremljanje ter preverjanje rezultatov edini način za potrditev učinkovitosti sterilizacije, kot tudi temeljnih zahtev za nadzor kakovosti in skladnost z zakonodajo. To ni le postopek 'zagona naprave', ampak postopek s-zaprto zanko, ki zahteva številne fizikalne, kemične in biološke dokaze.
Sledi sistematična analiza tehnik spremljanja in validacije.
Osnovno načelo: sistem trojnega preverjanja
Popolna validacija mora vključevati "spremljanje procesnih parametrov", "kemijske indikatorje" in "izzivno testiranje bioloških indikatorjev", ki se vsi dopolnjujejo in so nepogrešljivi.
Spremljanje procesnih parametrov (-nadzor v realnem času za zagotovitev, da pogoji ustrezajo standardom)
To je prva obrambna linija za preverjanje, ki vključuje-snemanje ključnih fizikalnih in kemičnih parametrov v realnem času prek senzorjev naprave, kar dokazuje, da sterilizacijski cikel deluje znotraj nastavljenega in učinkovitega obsega parametrov.
Parametri spremljanja:
Koncentracija hlapov vodikovega peroksida (ppm): najbolj kritičen parameter. Vnaprej določeno ciljno koncentracijo (npr. stotine ppm) je treba doseči in vzdrževati dovolj dolgo. Nizka koncentracija lahko povzroči neuspeh sterilizacije.
Relativna vlažnost (% RH): nadzorovana na nizki ravni (običajno<40%) to ensure that VHP is in an efficient "micro condensation" state rather than large droplet condensation. Excessive humidity can dilute disinfectants and may damage equipment.
Temperatura: spremljajte temperaturo komore, ki vpliva na tlak nasičene pare in proces kondenzacije.
Tlak/pretok zraka: Zagotovite, da je komora zatesnjena in da je kroženje plina normalno.
Čas izpostavljenosti: Trajanje, ki se vzdržuje pri ciljni koncentraciji.
Kako izvesti:
Samodejno dopolnjujejo senzorji in nadzorni sistem, vgrajen v generator VHP.
Ključna zahteva: oprema mora biti sposobna ustvariti in shraniti popolne ciklične podatkovne grafe (krivuljo koncentracije v času, krivuljo temperature in vlažnosti), ki morajo biti vključeni kot del validacijskega poročila. Vsako odstopanje parametra od prednastavljenega obsega mora povzročiti alarm ali prekinitev zanke.
Kemijski indikatorji (kvalitativni/polkvantitativni,-vizualni rezultati v realnem času)
Uporablja se za hitro in intuitivno ugotavljanje, ali je predmet izpostavljen sterilizacijskemu okolju z vodikovim peroksidom, in lahko posredno odraža, ali je odmerek zadosten.
Vrsta in princip:
Kartica s kemičnim indikatorjem vrste nalepke: Vsebuje barvila, občutljiva na vodikov peroksid. Ko se nabere zadostna količina odmerka vodikovega peroksida (koncentracija x čas), pride do nepovratnih sprememb iz ene barve v drugo.
Mesto namestitve: Postavite ga na najtežje dostopno mesto za sterilizacijo, kot je:
Najgloblji kotiček varnega delovnega prostora omare.
Znotraj drenažnega kanala.
Spoj med filtrom in namestitvenim okvirjem (če je izvedljivo).
Notranja izpušna cev (če je pokrita z dezinfekcijo).
Funkcija in omejitve:
Funkcija: Zagotavlja takojšnje rezultate za hitro sprostitev; Potrdite, da je bila para razporejena na določeno mesto; Kot identifikator za razlikovanje med "predelanimi" in "nepredelanimi" predmeti.
Omejitve: lahko dokaže samo izpostavljenost, ne more dokazati sterilnosti. Sprememba barve samo pomeni, da je bil dosežen prag najmanjšega odmerka, vendar ne zagotavlja uničenja vseh mikroorganizmov.
Izzivni test biološkega indikatorja (kvantitativni, končni dokaz učinkovitosti)
To je zlati standard preverjanja in odločilen dokaz. Z uporabo standardiziranih mikrobnih spor z znano visoko odpornostjo je neposredno dokazano, da postopek sterilizacije zadostuje za uničenje mikroorganizmov, ki jih je najtežje uničiti.
Izbor bioloških indikatorjev:
Standardni sev: Spore Geobacillus stearothermophilus. To je mednarodno priznana standardna testna bakterija z najmočnejšo odpornostjo na vodikov peroksid.
Oblika nosilca: običajno je papirni trak, obarvan s kapljicami suspenzije spor, pločevina iz nerjavečega jekla ali nameščen na posebnem nosilcu.
Znano število trosov: vsak biološki indikator vsebuje znano število trosov, običajno 10 ^ 5 do 10 ^ 6 CFU (enote, ki tvorijo kolonije).
Strategija umestitve (najbolj kritičen korak):
Lokacija: Postaviti ga je treba na "najhladnejšo točko", kjer je sterilizacija najbolj zahtevna ali kjer plin najtežje prodre. Priporočene lokacije za biološko varnostne omare vključujejo:
Pod delovno mizo, v kotu blizu sprednje rešetke.
Spoj med zadnjo steno in delovno mizo.
Na zadnji strani ali v režah notranjih instrumentov, kot so držala za pipete.
Če obseg preverjanja vključuje notranjost izpušnega ventila ali cevovoda.
Količina: Uporabite vsaj 3 biološke indikatorje in vključite eno netretirano pozitivno kontrolo.
Postopek testiranja in interpretacije:
Izpostavljenost: Izvedite celoten cikel sterilizacije VHP z omarico BI.
Recikliranje in gojenje:
Po končanem ciklu odstranite BI pod sterilnimi pogoji.
Postavite ga v namensko epruveto za obnovitev, ki vsebuje gojišče.
Kultivirajte v inkubatorju 56-60 stopinj C 24-48 ur (določen čas po navodilih).
Hkrati gojite pozitivno kontrolo (nesterilizirano) in negativno kontrolo (sterilno gojišče).
Razlaga rezultata:
Preverjanje uspešno: vsa sterilizirana gojišča BI ostanejo bistra (brez razbarvanja/motnosti), kar kaže, da spore niso preživete. Pozitivna kontrola mora pokazati aktivno rast (porumenelost/motnost gojišča), negativna kontrola pa mora ostati bistra.
Napaka pri preverjanju: Vsak obdelan BI, ki kaže rast (porumenelost/motnost), kaže na napako sterilizacijskega cikla. Treba je temeljito raziskati razloge (kot so napake parametrov, namestitev, okvare opreme, težave s tesnjenjem itd.), prilagoditi načrt in ponovno opraviti popolno verifikacijo.
Cikel in vrsta preverjanja
Prvo preverjanje:
Po namestitvi opreme VHP ali začetni sterilizaciji novega tipa varnostne omare je treba izvesti.
To je najobsežnejša verifikacija, ki zahteva določitev 'najhladnejše točke' in vzpostavitev učinkovitih parametrov zanke.
Redna obnova:
Običajno se izvaja vsakih šest mesecev ali letno.
Uporablja se za potrditev skladnosti opreme, programov in operaterjev.
Dnevno spremljanje:
Za vsak sterilizacijski cikel je treba uporabiti kemične indikatorje in pregledati karte parametrov postopka.
Pogostnost testiranja bioloških indikatorjev se lahko po potrebi zmanjša (na primer mesečno ali četrtletno), vendar je na območjih s strogimi predpisi morda potrebna uporaba vsake serije/cikla.
Dokumentirajte zapise in poročila (dokazi o skladnosti)
Vse dejavnosti spremljanja in preverjanja morajo biti uradno dokumentirane, poročilo pa mora vsebovati vsaj:
Podatki o opremi: model in številka generatorja VHP.
Informacije o ciljni napravi: model biološke omare, številka, lokacija.
Parametri zanke: nastavite ciljno koncentracijo, čas, temperaturo in vlažnost itd.
Graf procesnih podatkov: krivulja koncentracije in časa dejanskega delovanja itd.
Kemijski indikatorji: vrsta, številka serije, lokacija namestitve, rezultati spremembe barve (s priloženimi fotografijami).
Biološki indikatorji: sev, številka serije, količina trosov, mesto namestitve, rezultati kulture (priložene fotografije epruvete s kulturo).
Zaključek: Jasno ugotovite, ali je cikel sterilizacije učinkovit.
Izvajalec in datum: Podpis operaterja in recenzenta.
povzetek
Nesterilizirana sterilizacija je enaka nesterilizaciji.
Zanesljiv validacijski sistem za dezinfekcijo in sterilizacijo biološko varnostnih omar z vodikovim peroksidom je:
Zagotovite nadzor nad procesom s "preslikavo procesnih parametrov", dosežete hitro vizualno sproščanje s "kemičnimi indikatorji" in na koncu pridobite certifikat končne mikrobiološke učinkovitosti s "testiranjem bioloških indikatorjev".
Ta sistem trojne validacije je ključ do dviga dezinfekcije z vodikovim peroksidom iz "operacije" v sledljivo, ponovljivo in zanesljivo "znanost" in je tudi temelj izpolnjevanja zahtev GLP, GMP in akreditacije laboratorijev za biološko varnost doma in v tujini. Vodje laboratorija morajo to izvajati kot obvezen postopek in ga stalno spremljati.
